Skladiščenje semena
Ta metoda shranjevanja sperme (ejakulata), kot krizorezervacija, je postala precej razširjena v kriomedicini. Vključuje dodajanje posebnega medija do semenskega tekočine in nadaljnje zamrzovanje z uporabo tekočih dušikovih hlapov. Upoštevajte ta način ohranjanja moških spolnih celic podrobneje in vam povejte, kaj je sperma primerna za redčenje in nadaljnje skladiščenje.
Med naravno gnojenje se skrivnost moških spolnih žlez mešaj delno s celicami povrhnjice, zaradi česar se spremeni pH okolja, kar vodi k uničenju lipoproteinskega pokrova celic sperme, t.j. na njihovo aktiviranje. Biti v takem stanju je življenjska doba zarodnih celic močno omejena, kar onemogoča njihovo nadaljnjo uporabo pri IVF. Zato uporabljajo metodo krioprezervacija.
Ta tehnika znatno poveča rok trajanja sperme in vam omogoča, da:
- zmanjšati gibljivost sperme;
- jim daje dodaten vir energije;
- ščiti membrane zarodnih celic pred uničenjem;
- preprečuje kopičenje strupenih presnovnih produktov;
- blokira razmnoževanje mikroorganizmov v ejakulatu.
Kateri mediji se uporabljajo za shranjevanje sperme?
Da bi olajšali, tako imenovani postopek drobljenja ejakulata, ki je potreben za izolacijo zarodnih celic iz nje, predhodno razredčite spermo. Hkrati uporabite posebne reagente.
Danes je običajno uporabiti sintetične medije za shranjevanje sperme, od katerih vsak zahteva posebne pogoje. To vrsto okolja praviloma sestavlja več komponent, ponavadi vsaj tri od njih. Torej, v njihovi sestavi je mogoče razlikovati sladkorji, najpogosteje uporabljane glukoze in laktoze, natrijev citrat.
Če govorimo o posebnih kemičnih spojinah, ki jih lahko uporabimo za shranjevanje za spermo, jih je mogoče imenovati Tris buffer, Trilon B, EDTA, Spermosan PPK.
Pod kakšnimi pogoji se ejakulat shranjuje?Tehnologija zamrzovanja in shranjevanja semena vključuje spoštovanje posebnega načina hlajenja, pa tudi uporabo posebnih naprav. Hkrati mora biti laboratorijska soba opremljena z instrumenti, ki sterilizirajo zrak.
Pred zbiranjem ejakulata se v posebni omari sterilizirajo vse potrebne naprave za krioprezervacijo, zlasti vse vrste steklenic, graduiranih valjev, pipet, papirni filtri pri temperaturi 130-150 stopinj. Pred neposrednim postopkom ograje se namestijo v poseben termostat, ki ohranja stalno temperaturo 37 stopinj.
Po odvzemu vzorec moške sperme se postavi v sterilno bučko. Temperatura shranjevanja semena mora biti konstantna. Postopek hlajenja poteka v dveh fazah.
V prvem od teh se ejakulat najprej postavi v hladilno komoro, v kateri se temperatura postopoma spušča. Praviloma je njegova vrednost -35 stopinj. Po tem se globoko zamrzovanje izvede s potapljanjem posebne bučke s spermo v tekočem dušiku. V tem stanju lahko rok uporabnosti sperme doseže več desetletij.
Da bi prej uporabljali kriogeno rezervoar za ejakulacijo, jo posadimo v toplo vodo, kjer pride do počasnega odmrzovanja. Po tem se uporabljeni krioprotektanti odstranijo z večkratnim ponovnim oživljanjem sperme v centrifugi. Po tem se semenska tekočina nadomesti s hranilnim sredstvom, v katerem se spermatozo položi pozneje.